一株来自青藏高原土壤日本曲霉菌的分离鉴定及其杀东亚飞蝗活性研究

采用稀释涂布法从青藏高原采集的土样中分离得到一株具有杀蝗虫活性真菌D3-19.通过形态学观察以及ITS序列的分析,初步将D3-19鉴定为曲霉属日本曲霉(Aspergillus japonicas).室内活性测定结果表明日本曲霉D3-19发酵液和孢子均有杀东亚飞蝗活性.其中,真菌发酵液对东亚飞蝗校正死亡率为:96h(86.67%),144h(100%).与此同时,真菌孢子悬液对东亚飞蝗的LC50(致死中浓度)为3.42×105孢子/mL.研究结果表明,3×108孢子/mL的D3-19孢子悬液对不同年龄阶段东亚飞蝗均有致死效果.其LT50(半致死时间)值分别为:羽化成虫(155h),四至五龄成虫(104.8h),三龄幼虫(54.6h),二龄幼虫(30.6h).     

酸性木聚糖酶产生菌XYW5的筛选及酶学性质

【目的】选育优良的产酸性木聚糖酶的微生物,考察酸性木聚糖酶的酶学性质(尤其是pH值为4.0),为实现纤维素乙醇低成本清洁生产打下基础。【方法】从广西大学农场采集土壤,富集后经产酸性木聚糖酶的培养,比较酸性木聚糖酶酶活力,选育酸性木聚糖酶高产菌株,鉴定菌种,分析酶学性质。【结果】筛选出产酸性木聚糖酶酶活力较高的菌株XYW5。扩增菌株XYW5的ITS rDNA序列,经测序分析比对,将其初步鉴定为日本曲霉Aspergillus japonicus XYW5。菌株XYW5产酸性木聚糖酶和酸性木糖苷酶的酶活力最高分别达(26. 26±0. 97)U/mL和(0.63±0.02) U/mL,比活力分别为(85.50±0.63) U/mg和(1.80±0.01) U/mg;其酸性木聚糖酶最适温度和最适pH值分别为65℃和6.5,酸性木糖苷酶最适温度和最适pH值分别为70℃和4.5;酸性木聚糖酶兼有酸性CMCase酶活力,达到8.54 U/mL。【结论】菌株XYW5所产的酸性木聚糖酶具有开发成为优良工业酸性木聚糖酶的潜力。     

米曲霉自溶作用的研究Ⅱ自溶过程中细胞物质及酶活的变化

在米曲霉最佳的自溶条件下，对其自溶过程中重要的细胞物质及酶进行了测定，结果自溶液中测出１７种氨基酸酸，总氨基酸释放率为６８．７９％，核酸释放率为５０．００％，糖的释放率为２４．５８％，酸性蛋白酶活性高，而５’－磷酸二酯酶活性较低。     

人参皂甙Re的微生物降解研究

黑曲霉（ＡｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓｎｉｇｅｒＡ１０３）可将人参皂甙Ｒｅ降解为其次生甙，经２８℃振荡培养６～１２０小时，此种降解力最强，其降解最佳ｐＨ为４．０～５．０，在发酵液中添加５％蛋白胨或１％Ｔｗｅｅｎ８０均可提高黑曲霉降解Ｒｅ的程度．经紫外线和氯化锂复合诱变后，我们获得一株具高降解Ｒｅ能力的变异株ＡＵ＿（１２），可降解Ｒｅ形成两种次生甙．     

无花果曲霉植酸酶发酵及酶动力学

目的：研究野生型无花果曲霉植酸酶的动力学性质。方法：通过限制培养基中的无机磷,无花果曲霉发酵获得植酸酶。纯化后,对酶的动力学性质进行了研究。结果：该酶作用底物植酸钠的Km值为64．7μmol/L,对于植酸钠,植酸酶的最适反应pH为5．5温度为50℃。结论：无花果曲霉植酸酶在pH3.5－8．040℃以下比较稳定;不同的金属离子螯合剂对酶活性影响不一样,Ca^2 对酶活力有轻微的激活作用,Al^3 几乎无影响,Mg^2 、Fe^2 、Cu^2 对酶活力有抑制作用,Co^2 、Hg^2 、EDTA有较强的抑制作用。     

Expression of soluble human tumor necrosis factor receptor Ⅰ in Aspergillus niger

The cDNA of soluble human tumor necrosis factor receptorⅠ(sTNFRI) was inserted into fusion-protein expression plasmid pIGF of A. niger to construct fusion expression vector pHBC containing a KEX2 like protein processing site designed on the fusion position. Extracellular protease-deficient strain of A. niger 3.795-1-23 was transformed with pHBC. Positive clone was estimated by Southern hybridization. SDS-PAGE for protein produced by recombinant strain showed the distinctive expression band. Western blotting indicated that the secreted protein had immunoactivity of sTNFRI.     

植物核糖体抑制蛋白对黄曲霉（Aspergillus flavus）的抑制作用

测定了三种不同植物的核糖体抑制蛋白（RIRs）－－Momordin、Luffin和Saporin的抗真菌活性。结果显示,Momordin有最强的抗黄曲霉活性,Luffin次之,而Saporin对黄曲霉的生长无影响,所以,同一真菌对不同核糖体抑制蛋白的敏感程度不同。     

固态发酵生产饲用β-葡萄糖酶的产业化技术研究

采用黑曲霉菌株An08-752,经曲盘、发酵床(帘子床)、厚层通风制曲池进行固态发酵,产业化生产饲用β-葡萄糖酶,结果表明:通风曲池厚层通风发酵培养30～32 h,产β-葡聚糖酶最高,发酵酶活力达到1.15×105μ/g;发酵床发酵培养时间35～37 h,产β-葡聚糖酶最高,发酵酶活力达到1.28×105μ/g;曲盘发酵培养32～34 h,产β-葡聚糖酶最高,发酵酶活力达到1.36×105μ/g.     

产酸克雷伯氏菌的吸附固定及其产氢研究

利用曲霉(Aspergillussp.XF101)所形成的菌丝球吸附产氢细菌产酸克雷伯氏菌(Klebsiella oxytocaHP1),当曲霉培养时间为50 h,菌丝球直径为1.3~1.8 mm,菌悬液pH值为5.0~6.0,吸附温度为30℃,吸附时间为1.5 h时,可获得最佳吸附效果,吸附率可达99%以上.利用菌丝球固定产氢菌可进行连续产氢,其最大产氢速率为18 mmol/L.h,平均产氢速率为1.7 mmol/L.h,持续产氢时间为15 d.     

衣康酸生产菌株土曲霉QD-1发酵工艺的研究

筛选得到衣康酸生产菌株土曲霉QD 1,对其适宜的发酵工艺条件进行了研究。确定了最佳种龄、接种量和发酵最适初始pH。通过正交试验确定了最适发酵培养基组成,并对发酵过程中衣康酸生成 、菌体生长和糖的消耗规律进行了分析。